| 更新時間： | 2025-01-14 |
| 型 號： | |
| 所屬分類： | 病理學(xué)檢測實(shí)驗(yàn) |
| 報(bào) 價： | 60 |
提供商: 上海研謹(jǐn)生物服務(wù)名稱: 堿性磷酸酶染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)規(guī)格: 樣本實(shí)驗(yàn)周期： 3周說明： 含包埋切片、拍照價格： 60元收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)/服務(wù)周期/提供結(jié)果:歡迎咨詢詳談，我們會根據(jù)您的方案及需求制定詳細(xì)的服務(wù)協(xié)議。更多實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)請瀏覽網(wǎng)站其他內(nèi)容,或來電詳詢!
堿性磷酸酶染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)
堿性磷酸酶染色實(shí)驗(yàn)技術(shù)簡介:
堿性磷酸酶(AKP) 的顯示方法zui早由Gomeri (1939) 提出，現(xiàn)在這種方法稱為Gomeri法。堿性磷酸酶是指磷酸單酯酶I,它能在pH8. 6~10.0的zui適條件下分解磷酸單酯，對于與磷酸相接的醇基沒有特異性，Gomeri法是讓該酶在堿性條件下，分解甘油磷酸鈉，產(chǎn)生磷酸根。
堿性磷酸酶染色實(shí)驗(yàn)技術(shù)原理:
在一定條件下，使細(xì)胞中的酶作用于酶的底物，使其產(chǎn)物在原地進(jìn)行捕捉、沉淀轉(zhuǎn)化為有色產(chǎn)物。細(xì)胞組織中的堿性磷酸酶在堿性(PH9.0- 9.6)環(huán)境下使作用液中的底物(a- 磷酸萘酚鈉)水解，產(chǎn)生出a蔡酚，然后再與偶氮鹽偶聯(lián)，生成不溶性的耐曬染料(zui終產(chǎn)物的顏色因所用偶氮鹽的品種不同而有所不同)。
實(shí)驗(yàn)操作流程:
1、取材、固定、包埋、切片;
2.取已粘好烘干的切片兩塊，放入二甲苯(一)→二甲苯(二) (各3-4分鐘) 的染缸中進(jìn)行脫蠟，再經(jīng)100%乙醇(一)- +100%乙醇(二) - -95%乙醇- -90%乙醇- -70%乙醇- -30%乙醇- +z水。 每級各一分鐘，在移切片時，用鑷子夾住切片震蕩并提起，放下反復(fù)幾次，在移入下-染缸邊緣前稍停留。讓溶液滴凈后,再入下一染缸，以免把上一染缸溶液過多帶入下-染缸，而影響切片質(zhì)量;
3.將其中一塊切片以蠟筆作-標(biāo)記(用作對照組切片)，放入沸水中煮沸5分鐘;
4.將兩塊切片均放入AKP作用液中孵育30-60分鐘，作用液要事先預(yù)熱到37"C,水浴中進(jìn)行:
5、取出切片在蒸餾水中洗滌;
6、放入硝酸鈷溶液2-3分鐘;
7.蒸餾水沖洗干凈，否則切片易被污染，影響定位;
8、切片浸入硫化銨中2-3分鐘;
9.蒸餾水沖洗干凈;
10.經(jīng)各級酒精脫水。即30%乙醇- -70%乙醇- -90%乙醇- -950%乙醇- -100%乙醇 (二)- -100%乙醇 (一)，各級一分鐘在顯微鏡下觀察，細(xì)胞中有黑色沉淀存在的地方，就表明有酶的存在。煮沸的對照切片無黑色沉淀。
實(shí)驗(yàn)代做服務(wù)：
ELISA試劑盒免費(fèi)代檢測 | CCK8檢測 | 基因組DNA提取
| 蛋白相互作用分析 |
Western Blot
| 免疫組化 | 熒光定量PCR | 動物模型服務(wù) |
流式細(xì)胞檢測 | 細(xì)胞增殖 | 激光共聚焦 | DNA甲基化實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞劃痕 | 鈣離子濃度檢測 | 掃描電鏡實(shí)驗(yàn) | microRNA 測序 |
動物實(shí)驗(yàn) | Taqman探針 | ATP/ADP檢測
| 石蠟/冰凍切片 |
定點(diǎn)突變 | 線粒體膜電位(MMP)檢測 | 細(xì)胞生長曲線的測定 | 藥理毒理動物實(shí)驗(yàn)
|
免疫共沉淀 | 真核表達(dá)載體構(gòu)建 | 染色質(zhì)免疫沉淀CHIP | 非標(biāo)定量（Label-free）實(shí)驗(yàn) |
執(zhí)照.jpg)
