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　　葡聚糖凝膠（G-15）分離適用于天然產(chǎn)物在有機(jī)溶劑中的純化。例如：類固醇、萜類、脂類以及小分子多肽等，葡聚糖凝膠（G-15）同時適用于分子類別非常相似的物質(zhì)的分離和工業(yè)規(guī)模的制備，既可用于初步純化步驟，也可以用于zui終精制步驟。

　　葡聚糖凝膠（G-15）分離方法：

　　1. 乙醇浸泡：在室溫下，將干粉浸泡于50-60%乙醇中至少24小時，并不斷攪拌以保證凝膠溶脹，用無鹽水洗去殘存的乙醇濾干;

　　2. 無鹽水浸泡：室溫下，在無鹽水中充分溶脹24小時，間隙攪拌，以保證凝膠的*溶脹，然后；

　　3. 鹽酸浸泡：在常溫下再用0.2N HCl浸泡12小時，間隙攪拌，濾干，水洗只中性；

　　4. 將溶脹好的凝膠脫氣后（真空抽濾或超聲波）根據(jù)裝柱要求一次性置入柱內(nèi)，注意保持濕態(tài)裝柱，并避免柱內(nèi)產(chǎn)生氣泡或斷層；

　　5. 上樣前平衡層析柱至少3-5 個柱體積直到記錄儀基線變得平穩(wěn)為止（流出液的PH值等于上柱的Buffer 的PH值）；

　　6. 凝膠過濾的上樣量一般為5%的柱床體積，我們建議初次上樣控制在1-2%的床體積，視分離情況可以調(diào)整；脫鹽時上樣量可以達(dá)到20% 的柱床體積，柱高的選擇也與分離要求相關(guān)，柱高控制在40-50cm以下，過高的凝膠層會引起較大的反壓，應(yīng)當(dāng)盡可能避免。難分離物質(zhì)要有一定柱高和流速控制，脫鹽時高徑比為5：1 即可；

　　7. 洗脫方法：可以用無鹽水，也可以采用上柱時的緩沖液洗脫；在上柱Buffer 中加入NaCl等梯度洗脫或鹽梯度洗脫也可以*讓葡聚糖凝膠（G-15）分離純化；

　　8. 在位清洗（CIP）凝膠使用十次后作一次CIP，目的是去除柱床內(nèi)沉淀的及頑固殘留的蛋白。方法是以40cm/h 用1M 氫氧化鈉反向洗四個柱體積，再以至少三個柱體積平衡緩沖液再生。