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植物蛋白抽提試劑盒說明書

Plant Protein Extraction Kit

Cat. No.   K0885   

保存：蛋白酶抑制劑混合物：-20℃

    其它組分：室溫  

組分說明

Catalog no.                   K0885B       K0885C

Kit Size                      25 次          100  次

Plant Protein Extraction Reagent   25 ml         100 ml

蛋白酶抑制劑混合物           250  μl         1 ml

產(chǎn)品簡介

    本植物蛋白抽提試劑盒可從新鮮、冰凍或干燥植物組織中提取可溶性植物蛋白。適用于多種植物及植物的不同部位（如根、莖、葉、花、種子等）蛋白提取，高效提取植物蛋白，比傳統(tǒng)的方法提取蛋白產(chǎn)量大、活性高、速度快。所提蛋白可直接進(jìn)行蛋白電泳分析、免疫沉淀、Western  Blot、蛋白活性測定及蛋白純化等實驗。所提蛋白可用 BCA蛋白定量試劑盒（#K0014）進(jìn)行濃度的測定。

注意事項

 1. 本品含有1mM EDTA。

 2. 本產(chǎn)品適用于提取植物葉子、根等組織蛋白。

 3. 為防止蛋白降解，所有的操作盡量在冰上進(jìn)行。

 4. 使用本產(chǎn)品提取后蛋白，可采用BCA 法進(jìn)行蛋白定量。

 5. 為了獲得實驗J效果，請根據(jù)實驗調(diào)整J使用量。

操作步驟  

 1.  請在蛋白抽提前取出實驗所需蛋白抽提試劑進(jìn)行預(yù)冷，  按照1:99比例加入蛋白酶抑制劑混合物（例如990μl抽提試劑中加入10  μl蛋白酶抑制劑混合物），使蛋白酶抑制劑混合物在抽提試劑中成1×工作液。

     注意：在進(jìn)行蛋白抽提前2-3分鐘內(nèi)加入蛋白酶抑制劑混合物。

 2.  稱量試驗植物組織的重量。按照組織：抽提試劑=1：5（g/ml）的比例加入蛋白抽提試劑并勻漿處理（裂解液的使用量依據(jù)植物不同部位的而定）。若需要濃縮的蛋白提取物，可適當(dāng)減少植物蛋白抽提試劑使用量。

     注意：勻漿前將大塊的植物組織剪成小塊，機(jī)械勻漿器可選用30,000rpm，勻漿10s，間歇10s，反復(fù)三次進(jìn)行裂解，根據(jù)組織樣本不同選用適合的勻漿方式。

 3.  勻漿后冰上孵育20分鐘（冰上放置時間可適當(dāng)延長至30分鐘）。

 4.  4℃  12,000 rpm，離心20分鐘。

 5.  收集上清中的可溶性蛋白，進(jìn)行下一步的純化或下游分析。

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