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蛋白銀染試劑盒說明書

Protein Silver Stain Kit

蛋白銀染試劑盒

目錄號：K2012

保存條件：室溫保存。

組分說明

                  Cat. No.                          K2012

                  Kit Size                            20次

                  Silver Stain Sensitizer（500×）      2×1 ml

                  Silver Stain Enhancer                3ml

                  Silver Stain                      2×250 ml

                  Silver Stain Developer            4×125 ml

產(chǎn)品簡介

　　本試劑盒采用高靈敏度的銀染染料，可應(yīng)用于變性膠及非變性膠的蛋白染色，具

有目的條帶清晰、背景低，操作時間可靈活控制的優(yōu)點。另外，本試劑盒增加了一步

短時敏化作用步驟，可明顯降低背景及提升目的條帶的亮度。

注意事項

1．操作時請使用去離子水和潔凈的玻璃或塑料器皿，須戴一次性手套進行操作。

2．整個銀染過程需在搖床上進行，搖床轉(zhuǎn)速約60 rpm左右。

3．需自備乙醇，冰醋酸。

                本產(chǎn)品僅供科研使用，請勿用于臨床診斷及其他用途

    使用說明

    　　以下操作步驟中各溶液的用量以大小為8.5×5.5 cm、厚度為1.0 mm的凝膠為例，以凝膠全部浸沒到溶液為準(zhǔn)，一般用量25 ml。對于大型凝膠，各溶液的使用量需按凝膠體

積的比列放大。請?zhí)崆皽?zhǔn)備好50 ml固定液（超純水：乙醇：冰醋酸=6:3:1）、50 ml洗脫液（10%乙醇）和50 ml終止液（5%的冰醋酸）。

    1．水洗：電泳完成后，用超純水洗膠2次，每次洗滌5分鐘。

    2．固定：用25 ml固定液固定凝膠2次，每次固定15分鐘。

    3．洗脫：固定完成后用洗脫液洗膠2次，每次洗滌5分鐘。

    4．水洗：用超純水洗膠2次，每次洗滌5分鐘。

    5．增敏：將上一步洗好的凝膠置于銀染增敏工作液中，室溫下準(zhǔn)確孵育1分鐘后用超純水洗膠3次，每次洗滌20秒。

     銀染增敏工作液的配制：取50 µl Silver Stain Sensitizer（500×）加入到25 ml超純水中，混勻。

    6．銀染：棄去超純水，將凝膠置于銀染工作液中孵育30分鐘。

       銀染工作液的配制：取25ml Silver Stain加入50 µl Silver Stain Enhancer混勻。

    7．水洗：用超純水快速洗膠2次，每次洗滌準(zhǔn)確控制為20秒。

    8．顯影：立即將洗好的凝膠浸沒在顯影液中，室溫孵育2-3分鐘，直至蛋白條帶顯示清晰。

       顯影液的配制：取25ml Silver Stain Developer加入30µl Silver Stain Enhancer混勻。

       注意：顯影30秒內(nèi)，蛋白條帶開始顯現(xiàn)，繼續(xù)顯影至2-3分鐘。若蛋白條帶顯色較淺，可適當(dāng)延長顯影時間至5分鐘及以上。

    9．終止：用終止液洗去凝膠上的顯影液后，將凝膠浸泡在新的終止液中反應(yīng)10分鐘。

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